血凝抑制实验报告

一、实验目的

血凝抑制试验在多种疾病的研究与检测中有重要意义。例如在禽类疾病检测方面，可用于新城疫、产蛋下降综合征和传染性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、疫苗免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等；对于流感病毒而言，可用于流感病毒分离株HA亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体 。

二、实验材料

• 试剂：新城疫抗原（以新城疫病毒检测为例）、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、阿氏（Alsevers）液（用于配制禽流感相关检测试剂，称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml，散热溶解后调pH值至6.1，69kPa 15min高压灭菌，4°C保存备用）、3.8%枸橼酸钠（3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水，101kPa，20min高压灭菌，4°C保存备用，保存期1个月）、PBS液（用于禽流感检测相关操作）。
• 仪器：离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等 。

三、实验方法

（一）样本采集

• 所采样本要具有代表性，通常采用四角加中间的随机取样法。对于鸡群数量不同，采样率有所区别，1000只以下的鸡群采样率在2 - 5%；5000只以下1 - 2%；5000只以上0.5 - 1%。
• 取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，注意不要用消毒剂，以免影响结果。每只鸡采血量在1ml左右，最好不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出 。

（二）1%鸡红血球的制备（以新城疫检测为例）

1. 采血：用长针刺入鸡心脏或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为1∶3 - 4。
2. 洗血球：共洗4 - 5次，每次5 - 8分钟，红血球与生理盐水的比例至少为1∶2 - 3。离心机转速为每分钟1500 - 3000转，最后倾去上清。
3. 配制成1%红血球备用：吸红血球泥1ml加生理盐水99ml 。

（三）血凝试验（以新城疫检测为例）

1. 在血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于第一孔内，混匀后吸出同量于第二孔内混匀，以此类推稀释至第11孔，并弃去0.05ml，留第12孔作为生理盐水对照，然后全部孔内加入1%鸡红血球。
2. 将血凝板置于振荡器上振荡1 - 2分钟，使材料充分混均，放入恒温培养箱，每5分钟观察一次，至10 - 15分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清晰地出现为准。
3. 结果判定：
   • 红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集(++++)。
   • 在血凝板底部集为一小红点为沉淀(-)。
   • 如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集(++)。
4. 出现完全凝集的抗原的最高稀释度，即为该抗原的凝集价。
5. 四单位抗原的制备：血凝试验的结果如为2⁸(256)，则前移2孔即2⁶(64)，作为四单位抗原的稀释度。即：63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原 。

（四）血凝抑制试验（以新城疫检测为例）

1. 在血凝板上1 - 11孔全部加入0.05ml的生理盐水，于第一孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。
2. 结果判定：能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。注：

• HI价在2³ - 2⁴时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到2⁴ - 2⁵免疫。
• 2⁴ - 2⁵ < HI < 2¹⁰时为最好。
• 如HI价高于2¹¹则为强毒污染。注：#为完全抑制，++为不完全抑制，-为不抑制 。

（五）禽流感血凝抑制试验操作（禽流感检测相关）

1. 血凝试验操作程序
   • 取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的1 - 12孔每孔加25μL PBS液。
   • 吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
   • 从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25μL加入到第3孔中，依次实行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔，最后弃去25μL。第三排孔至第四排孔同上操作。
   • 依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL 1%的鸡红细胞悬液。
   • 将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温(20 - 25°C)静置30min观察结果（如果环境温度太高，可置4°C环境下）。
   • 结果判定：将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集（不流淌）的抗原或病毒稀释倍数为1个血凝单位(HAU)。
2. 血凝抑制试验操作程序
   • 根据血凝试验结果配制4HAU抗原。（即1HAU抗原除以4）。
   • 取96孔V形酶标板，用移液器在第1 - 12孔各加入25μL PBS。
   • 在第1孔加入25μL被检血清，充分混匀后移出25μL加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25μL 。

四、实验注意事项

• 样本方面：样本采集要遵循正确的采样率和采样方法，采集容器要避免消毒剂残留影响结果。
• 抗原方面
  • 要获得准确的监测效果，对于四单位抗原的准确性要重视，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。
  • 在禽流感检测中，每次试验时需要进行抗原标准化。
• 红细胞方面
  • 原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡，有时甚至是病鸡。
  • 洗红血球过程中，应注意动作

血凝与血凝抑制实验报告(三篇)

血凝与血凝抑制实验报告篇一用于新城疫、产蛋下降综合征和传梁性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、疫苗免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等。 下面以新城疫病毒为例，介绍血凝和血凝抑制试验的方法:一、样本要具有代表性:所采样本要能代表整体，通常采用四角加中间的随机取样法，并且确定适当的样品数量，一般1000只以下的鸡群采样率在2~5%;5000只以下1~2%;5000只以上0.5~1%。 方法是:取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，并注意不要用消毒剂，以免影响结果。 每只鸡采血量在1ml左右，最好不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出。 二、四单位抗原的准确性:要获得准确的监测效果，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。 三、红血球洗脱的充分性:原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡，有时甚至是病鸡。 另外，洗红血球过程中，应注意动作要轻，玻璃仪器之间尽量减少碰撞，以免造成红血球破裂而影响结果。 四、结果判定的及时性:检测中，每次试验均应设抗原与生理盐水对照，加入红血球后，每隔5分钟观察一次，一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时，应立即对样本进行结果判定，过早过晚都会影响判定结果的准确性。 一、材料与仪器:新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔v型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。 二、方法:1%鸡红血球的制备:1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为1∶3~4。 2.洗血球:共洗4~5次，每次5~8分钟，红血球与生理盐水的比例至少为1∶2~3。 离心机转速为每分钟1500~3000转，最后倾去上清。 3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml，配成1%红血球备用。 三、血凝试验:1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于第一孔内，混匀后吸出同量于第二孔内混匀，以此类推稀释至第11孔，并弃去0.05ml，留第12孔作为生理盐水对照，然后全部孔内加入1%鸡红血球。 2.将血凝板置于振荡器上振荡1~2分钟，使材料充分混均，放入恒温培养箱，每5分钟观察一次，至10~15分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。 3.结果判定:红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集(++++)，在血凝板底部集为一小红点为沉淀(-)，如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集(++)。 4.出现完全凝集的抗原的最高稀释度，即为该抗原的凝集价。 5.四单位抗原的制备:血凝试验的结果如为28(256)，则前移2孔即26(64)，作为四单位抗原的稀释度。 即:63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。 四.血凝抑制试验:1.血凝板上1~11孔全部加入0.05ml的生理盐水，于第一孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。 2.结果:能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。 注:1、hi价在23~24时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到24~25免疫。 2、24~25<hi<210时为最好。 3、如hi价高于211则为强毒污染。 注:#为完全抑制，++为不完全抑制，-为不抑制。 流感病毒颗粒表面的血凝素(ha)蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，ha试验由此得名。 ha蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰ha蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。 该试验是目前who进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。 可用于流感病毒分离株ha亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。 只有当抗原和抗体ha亚型相一致时才能出现hi现象，各亚型间无明显交叉反应;除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素;需要在每次试验时进行抗原标准化;需要正确判读的技能。 1阿氏(alsevers)液配制称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml，散热溶解后调ph值至6.1，69kpa15min高压灭菌，4保存备用。 (3.8%枸橼酸钠(3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水)，101kpa，20min高压灭菌，4保存备用，保存期1个月)。

血凝抑制实验报告- 文档之家

血凝抑制实验报告 禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可 和国际动物健康组织实行世界流感监测所普遍采用的方法，而且因其 具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品，并能在短 时间内报告禽流感抗体水平等优点，已经成为当前基层兽医实验室禽 流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为。 操作影响较大，经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复 性差等问题，现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项 一、血凝试验操作程序 1、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的 1~12孔每孔加25μLPBS液。 2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸 取25μL加入到第3孔中，依次实行倍比稀释至第二排最后一孔即第 24孔，最后弃去25μL。第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。 5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温(20-25℃)静置30min观察结果(如果环境温度太高，可置4℃环境下)。 6、结果判定:将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。 以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒稀释倍数为1个血凝单位(HAU)。 二、血凝抑制试验操作程序 1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。(即1HAU抗原除以4)。 2、取96孔V形酶标板，用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。 3、在第1孔加入25μL被检血清，充分混匀后移出25μL加至第 2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25μL。 4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份)，作对照孔。 5、在第1~12孔各加入25μL4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻 混匀，室温20-25℃下静置30min。 6、每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液。 置于微量振荡器上轻轻混匀，室温(20-25℃)静置40min后观察结果，若环境温度过高，可于4℃条件下实行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2，阳性对照 孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。将酶标板作45°倾斜，以。 完全抑制红细胞凝集的稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检。 血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。 三、试验过程中的注意事项 1样品的保存及试验前处理 1.1采集的血液样品应即时分离血清，分装至离心管中，标记清楚，离心后吸出血清，对应编号冷藏送检，并禁止运输过程中剧烈震动。 1.2一般情况下，在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏，否则低温冷冻保存。 1.3在检测前血清样品应充分混匀，混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可，切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。 1.4对出现胶冻状的血清样品，可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。 胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清，可能。 是因为放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其。 中少量的清亮血清。 1.5水禽等样品为排除非特异性反应，还应相对应实行灭能反应。 具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞，轻摇后静置30分钟，离心，收集上清液即可。 2器材的选择 2.1酶标板的选择: 建议使用96孔90°V型板实行试验，通过反复试验证明:90°V 型板相对于110°板及130°板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的 凝集图像清晰、结果容易判定等优点。 2.2移液枪的选择及使用: ①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程，以便精确度的 深入液下缓慢平稳吸液。 倍比稀释血清时，应每孔至少反复吹吸6次，以便混合均匀，还应注意尽量避免产。 生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样，以。 免交叉污染，影响试验结果。 ③加样、倍比稀释时应高度集中注意力，以免漏加、重复加样等。 3试剂的保存及配置 3.1禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求实行保存和配置，试验前应提前将其恢复至室内温。 抗原的保。 存温度为-20℃，反复冻融会降低抗原的滴度，应避免反复冻融。 3.2PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备。 ①应尽量现用现配。 ②每次使用前应测PH值，以免时间过长而导致PH值发生改变。 ③因为PH试纸跨度范围偏大，PH值不易准确介定，所以采用酸度计准确测量PH值，以提升试验的精确度。 ④全部试验均采用同一种稀释液。 3.31%红细胞的制备。 ①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象，所以配制1%红细胞悬液 当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加 入抗凝剂，如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。

血凝试验原理 血凝及血凝抑制试验→MAIGOO知识

评论摘要:有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象，血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验。 血凝抑制实验是一种测定抗原或抗体的技术。 即加入特异性抗体或特异性抗原后，使原有的血凝反应被抑制。 下面本文就为大家介绍一下血凝试验原理，和血凝吉血凝抑制试验，希望各位网友能够喜欢。 血凝试验原理血凝及血凝抑制试验 (1)实验原理:流感病毒表面的血凝素能与人的O型红细胞、豚鼠和鸡的红细胞上的血凝素受体结合，引起红细胞凝集。 (2)实验材料 ①流感病毒的尿囊腔培养液或羊膜腔的羊水培养液。 ②病人血清、0.5%鸡红细胞悬液。 ③流感病毒型与亚型免疫血清。 ④试管架、无菌小试管、无菌生理盐水、毛细滴管。 (3)实验方法 ①取小试管9支，第1管加生理盐水0.1ml，其他各管均加0.5ml。 这样各管的液体量均为0.5ml，从第1管至第8管的尿液稀释度为1:10，1:20…1:1280，第9管为生理盐水对照管。 ③稀释完毕后每管加入0.5%鸡红细胞悬液0.5ml.混匀，室温放置30—45min，立即观察结果，观察时轻拿、勿摇。 (4)结果判定各管出现鸡红细胞凝集程度以、、、、—表示，以出现病毒的最高稀释度为血凝效价。 如果血凝试验阳性，应该进一步做血凝抑制试验鉴定该病毒的型甚至亚型。

血凝抑制实验报告(通用3篇)

血凝抑制实验报告 血凝抑制实验报告(通用3篇) 血凝抑制实验报告篇1 一、原理 流感病毒颗粒表面的血凝素(HA)蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，HA试验由此得名。 HA蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰HA蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。 二、应用 该试验是目前WHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。 可用于流感病毒分离株HA亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。 三、缺点 只有当抗原和抗体HA亚型相一致时才能出现HI现象，各亚型间无明显交叉反应;除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素;需要在每次试验时进行抗原标准化;需要正确判读的技能。 四、试验步骤 1阿氏(Alsevers)液配制 称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100mL，散热溶解后调pH值至6.1， 69kPa15min高压灭菌，4℃保存备用。 (3.8%枸橼酸钠(3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水)，101kPa，20min高压灭菌，4℃保存备用，保存期1个月)。 2.1采血 用注射器吸取阿氏液约1mL(3.8%枸橼酸钠)，取至少2只SPF鸡(如果没有SPF鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡)，采血约2～4mL，与阿氏液混合(3.8%枸橼酸钠)，放入装10mL阿氏液(生理盐水)的离心管中混匀。 2.2洗涤鸡红细胞 将离心管中的血液经1500～1800r/min离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液(生理盐水)，轻轻混合，再经1500～1800r/min离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复2次以上过程后，加入阿氏液20mL(生理盐水)，轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过5天。 2.310%鸡红细胞悬液 取阿氏液保存不超过5天的红细胞，在锥形刻度离心管中离心1500～1800r/min8分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞体积(mL)，加入9倍体积(mL)的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。 (此步。 2.41%鸡红细胞液 取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1mL，加入9mL生理盐水，混合均匀即可。 (根据检测血清的数量，估算一下需要的1%鸡红细胞量，可按0.3ml/每份血清)。 3抗原血凝效价测定(HA试验，微量法) 3.1在微量反应板的1孔～12孔均加入25μlPBS(生理盐水)，换滴头。 3.2吸取25μl抗原加入第l孔，混匀。 3.3从第1孔吸取25μl，病毒液加入第2孔，混匀后吸取25μl加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取25μl弃之，换滴头。 3.4每孔再加入25μlPBS(生理盐水)。 3.5每孔均加入25μl体积分数为1%鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)。 3.6振荡混匀，在室温(20～25℃)下静置40min后观察结果(如果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时)。 对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。 3.7结果判定将板倾斜，观察血凝板，判读结果。 能使红细胞完全凝集(100%凝集，++++)的抗原最高稀释度为该抗原的血凝效价，此效价为1个血凝单位(HAU)。 注意对照孔应呈现完全不凝集(-)，否则此次检验无效。 4血凝抑制(HI)试验(微量法) 4.1根据3的试验结果配制4HAU的病毒抗原。 以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4HAU的抗原的稀释倍数。 4.2在微量反应板的1孔～11孔加入25μlPBS(生理盐水)，第12孔加入50μlPBS(生理盐水)。 4.3吸取25μl血清加入第1孔内，充分混匀后吸25μl于第2孔，依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μl弃去。 4.41孔～11孔均加入含4HAU抗原25μl，室温(约20℃)静置至少30min。 4.5每孔加入25μl1%的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置约40min(室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件下进行)，对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。 4.6结果判定 试验成立的条件:只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。 以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。 HI价小于或等于31og2判定HI试验阴性;HI价大于或等于41og2为阳性。 五、HI试验注意事项 1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对Re-4和Re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。 同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。 一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的HI效价较高。

血凝抑制试验就诊指南

血凝抑制试验就诊指南血凝抑制试验就诊指南针对血凝抑制试验患者去医院就诊时常出现的疑问进行解答，例如:血凝抑制试验检查挂什么科室的号哪些人不适宜做血凝抑制试验检查血凝抑制试验检查前要准备什么血凝抑制试验检查中要注意事项等等。 血凝抑制试验就诊指南旨在方便血凝抑制试验检查患者就医，解决血凝抑制试验患者就诊时的疑惑问题。 有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象，血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验，一种测定抗原或抗体的技术。 即加入特异性抗体或特异性抗原后，使原有的血凝反应被抑制。 相应抗体与病毒结合后，阻止病毒表面HA与红细胞结合，常用于正粘病毒、副粘病毒及黄病毒等的辅助诊断、流行病调查，也可用于鉴定病毒型与亚型。 需检查人群新生儿和孕妇者有需要，和带有相关病毒的患者，以做医疗的测定检查前准备禁忌暴饮暴食，应空腹抽血。 检查中注意事项检查者处于平静状态，采血前不应拍打采血部位，必须顺利\"一针见血\"，避免混入组织液或发生溶血。 阳性:相应抗体与病毒结合后，阻止病毒表面HA与红细胞结合，常用于正粘病毒、副粘病毒及黄病毒等的辅助诊断、流行病调查，也可用于鉴定病毒型与亚型。

血凝抑制实验报告

血凝抑制实验报告 1、血凝抑制实验报告 随着养殖业的飞速发展和广养殖户科学意识的不断提高，人们普遍认识到实验室检测技术在临床应用的重要性。 下面简单介绍一下鸡新城疫微量血凝试验和血凝抑制试验的注意事项及操作方法。 用于新城疫、产蛋下降综合征和传梁性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、疫苗免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等。 下面以新城疫病毒为例，介绍血凝和血凝抑制试验的方法: 注意事项: 一、样本要具有代表性:所采样本要能代表整体，通常采用四角加中间的随机取样法，并且确定适当的样品数量，一般1000只以下的鸡群采样率在2～5%;5000只以下1～2%;5000只以上0.5～1%。 方法是:取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，并注意不要用消毒剂，以免影响结果。 每只鸡采血量在1ml左右，最好不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出。 二、四单位抗原的准确性:要获得准确的监测效果，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。 三、红血球洗脱的充分性:原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡，有时甚至是病鸡。 另外，洗红血球过程中，应注意动作要轻，玻璃仪器之间尽量减少碰撞，以免造成红血球破裂而影响结果。 四、结果判定的及时性:检测中，每次试验均应设抗原与生理盐水对照，加入红血球后，每隔5分钟观察一次，一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时，应立即对样本进行结果判定，过早过晚都会影响判定结果的准确性。 血凝与血凝抑制试验的操作方法 一、材料与仪器:新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。 二、方法: 1%鸡红血球的制备: 1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为1∶3～4。 2.洗血球:共洗4～5次，每次5～8分钟，红血球与生理盐水的比例至少为1∶2～3。 离心机转速为每分钟1500～3000转，最后倾去上清。 3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml，配成1%红血球备用。 三、血凝试验: 1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于第一孔内，混匀后吸出同量于第二孔内混匀，以此类推稀释至第11孔，并弃去0.05ml，留第12孔作为生理盐水对照，然后全部孔内加入1%鸡红血球。 2.将血凝板置于振荡器上振荡1～2分钟，使材料充分混均，放入恒温培养箱，每5分钟观察一次，至10～15分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。 3.结果判定:红血球在应板底部全部均匀铺开为完全凝集(++++)，在血凝板底部集为一小红点为沉淀(-)，如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集(++)。 4.出现完全凝集的抗原的最高稀释度，即为该抗原的凝集价。 5.四单位抗原的制备:血凝试验的结果如为28(256)，则前移2孔即26()，作为四单位抗原的稀释度。 即:63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。 四.血凝抑制试验: 1.血凝板上1～11孔全部加入0.05ml的生理盐水，于第一孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。 在振荡器上振荡1～2分钟，放置室温约20分钟，然后加入等量的1%鸡红血球，振荡后放入恒温培养箱约10～15分钟后进行结果判定。 2.结果:能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。 注:1、HI价在23～24时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到24～25免疫。 2、24～25HI210时为最好。3、如HI价高于211则为强毒污染。 注:#为完全抑制，++为不完全抑制，-为不抑制。 2、实验报告实验心得 在公司实习的这段时间里，我在公司主要负责xx。 我想这些对于一个实习生来说是太难得的锻炼机会，所以我也十分的珍惜。 对上头的指示都按时完成，有很多不懂的操作我也进取地去提问在一系列工作的同时，我也尽可能的运用自我所学的专业知识，以便到达能够新颖的全面的展现我公司的实力以及产品或者活动的内涵，从而产生相对进取的社会影响力，因为对于新生的企业，社会影响是企业前进与生存不可忽略的一方面，是容不得怠慢的。 在实习的这段时间里我感受到了要生存于社会之中的不易与艰难。 室内设计是个苦差使，每个设计师都不容易。 但我既然在填报高考志愿的时候选择了这个专业，我此刻也未曾后悔过我的选择。 我个人认为室内设计工作者不仅仅要有专攻并且还要博闻强识。

「血凝抑制试验」血凝抑制试验的介绍

有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象，血凝现象能被相应抗体血凝抑制试验，一种测定抗原或抗体的技术。即加入特异性抗体或特异性抗原后，使原有的血凝反应被抑制。...[][]血凝抑制试验注意事项不合宜人群:无特殊要求。检查前禁忌:禁忌暴饮暴食，和剧烈运动，一般是早晨空腹检测。检查时要求:要注意试验时室内的温度，注意血清标本不被污染，会导致结果呈假阳性。阴性:正常:试验后的结果呈阴性。相应抗体与病毒结合后，阻止病毒表面HA与红细胞结合，常用于正粘病毒、副粘病毒及黄病毒等的辅助诊断、流行病调查，也可用于鉴定病毒型与亚型。

血凝抑制实验(HAI)的原理、步骤和结果分析

【原】血凝抑制实验(HAI)的原理、步骤和结果分析 HAI实验原理: 以麻疹病毒为例，其他能够引起血凝的病毒也是如此。 当麻疹病毒和红细胞混合时，就会发生血凝。 但是，如果感染麻疹病毒的人的血清与红细胞和麻疹病毒混合，红细胞就不会有任何凝集，这种现象被称为血凝抑制(HAI)。 如果患者的血清中不含针对测试病毒表面蛋白的抗体，则会出现血凝，因为表面分子仍然可以凝集红细胞(阴性结果)。 HAI检测的原理是针对该特定病毒(例如麻疹病毒)的抗体能够阻止病毒附着在红细胞上。 因此，当存在抗体时，血凝会受到抑制。 HAI 滴度:抑制血凝的最高血清 (Ab) 稀释度称为血清的 HAI 滴度。 同样，如果存在针对麻疹病毒的抗体，则在抗体充分稀释之前不会观察到血凝。 由于存在非特异性病毒血凝抑制剂和红细胞天然凝集素，HAI试验可能变得复杂。 因此，血清应在使用前进行处理，否则可能会出现假阳性或假阴性结果。 HAI实验所需试剂和材料: 在Alsever溶液或肝素中收集的特定物种(鸡、鹅、小鼠或豚鼠)的红细胞 从血清中去除非特异性血凝素的试剂 用于血清学检查的感染培养液或标准抗原(例如制备的流感病毒) HAI实验步骤: 1.获取具有已知HA滴度的病毒(例如流感病毒)。首先要测定病毒的HA滴度。 2.要测试的患者/测试血清的两倍梯度稀释液，例如从1:4到1:1024。 3.向96孔板的每个孔中加入4个HA滴度的病毒，血清对照孔除外。 4.室温下静置60分钟(时间根据具体要求而有所不同)。 5.加入红细胞(RBC)并在4°C下孵育30分钟。 6.读取HAI滴度数据。 HAI实验结果分析: 抑制血凝形成的血清(Ab)最高稀释度称为血清的HAI滴度。 如上图所示，血清稀释度为1280时能够抑制血凝，而血清稀释度为2560时不能抑制血凝，因此HAI滴度为1280。 HAI实验的应用: (1)血凝抑制试验广泛用于诊断由正粘病毒(流感)、副粘病毒(麻疹、流行性腮腺炎)、单核细胞增多症、虫媒病毒-托加病毒(包括风疹)、黄病毒和布尼亚病毒引起的感染。 (2)可以通过血凝来检测感染细胞培养物中病毒的存在。也可以通过特异性抗体的HAI来诊断病毒的类型。 (3)虽然流感病毒可以通过血凝来检测，但不同流感病毒分离株的分型最有效方法是血凝抑制(HAI)。 HA实验质控: 1.已知的阳性血清 2.已知的阴性血清 3.血清和无抗原细胞(用于检测非特异性凝集) 4.抗原血凝活性的反滴定，以确保使用的是4个血凝滴度的病毒 更多如何诊断儿童流感?如何诊断儿童流感?1、流行病史当地有流感流行信息，对诊断最有帮助。 (2)血凝和血凝抑制试验:流感病毒具有凝集豚鼠红细胞(或鸡和人o型红细胞)的能力。

血凝及血凝抑制实验

血凝及血凝抑制实验首页专题库PPT模板库文档定制热门检索牛人榜常见问题1、实验二实验二血凝及血凝抑制血凝及血凝抑制实验实验实验目的实验目的血凝试验:滴定病毒的血凝效价(病毒的凝集价)，采用一定的病毒量，通常采用4个血凝单位。 血凝抑制试验:应用标准病毒液测定血清中的相应抗体或应用特异性抗体鉴定新分离的血凝性病毒检测实验用鸡群有无病毒感染和监测鸡的免疫状态。 掌握基本操作技术，了解其实用价值实验原理实验原理血凝素(HA)柱状流感病毒结构模式图刺突:亚型特异性抗原，易变异血凝素(HA，从H1H15):呈柱状功能:吸附细胞:与细胞上受体结合，使病毒侵入细胞凝集多种动物的红细胞(血凝试验)具抗原性:其抗体能中和病毒-中和抗体抑制血凝(血凝抑制试验)血凝试验原理血凝试验原理血凝素(hemagglutininHA):由病毒基因编码的糖蛋白刺突。 与病毒吸附和传入宿主细胞有关。 HA能与人或其它动物多种红细胞表面N乙酰神经氨酸酶受体结合引起红细胞凝集。 为病毒的红细胞凝集反应或血凝反应。 血凝原理血凝抑制原理血凝抑制试验原理血凝抑制试验原理病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，即抗体与病毒结合后，血凝素无法吸附于红细胞表面的受体上，用免疫血清阻止红细胞2、凝集的现象，称为血凝抑制血凝抑制实验材料实验材料器材:U型或V型微量反应板、微量移液器、枪头试剂:1%鸡红细胞、NDIV血凝素、NDIV抗血清、生理盐水实验步骤实验步骤1.取96孔V型反应板1块置于水平实验台上，在第1排1-10孔内加入25ul生理盐水，第11孔不加。 第12孔加25ul生理盐水2.在第1孔内加入血凝素25ul，混匀后吸出25ul加入第2孔内，再混匀后吸出25ul加入第3孔内，依次类推至第10孔时弃掉25ul。 第12孔不加作阴性对照孔。 3.在1-12孔均加入25ul的生理盐水。 4.在每孔内加入25ul1%的鸡红细胞悬液，震荡，室温静止感作15-30min，每5min观察一次结果。 5.计算血凝效价，稀释使成为四价备用血凝试验结果判定效价判定:凝集特别显著:\"\"凝集现象次之:\"\"凝集清楚可见:\"\"稍显凝集者:\"\"血凝效价:呈\"\"凝集时的最高稀释度。 此时的稀释度即为1个血凝单位。 结果判定结果判定1.在各组对照均正确的情况下，按下列标准判定血凝反应强度示意图\"4\"红细胞呈片状凝集，均匀布满孔底，边缘有时不整齐或皱缩。 \"3\"红细胞呈片状凝集，但面积略小于\"4+\"。 \"23、\"红细胞呈片状凝集，但有少许沉积孔底中部呈小圆点状。 \"\"红细胞大部分沉于孔底中央，周围有少量散在凝集颗粒。 \"\"红细胞均沉于孔底呈小圆点状，边缘整齐。 2.对照孔正常的情况下，红细胞凝集100%的稀释度为判定血凝价的终点。 凡能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数为病毒的凝集价。 血凝抑制血凝抑制1.取96孔V型反应板1块置于水平实验台上，在第1排1-10孔内加入25ul生理盐水，第11孔不加。 第12孔加25ul生理盐水。 2.在第1孔内加入被检血清25ul，混匀后吸出25ul加入第2孔内，再混匀后吸出25ul加入第3孔内，依次类推至第10孔时弃掉25ul。 3.在1-12孔内均加入\"四价\"血凝素25ul，震荡后，室温静止作用5min。 4.在1-12孔内均加入1%的鸡红细胞悬液25ul，震荡，室温感作15-30min，每5min观察一次结果。 5.观测结果，记录实验数据血凝抑制试验结果判定血凝抑制试验结果判定测定孔RBC沉于孔底中心，呈纽扣状。 (+)凝集(-)病毒对照孔:凝集RBC对照孔:无自凝血凝抑制试验效价:呈完全血凝抑制使的最高血清稀释度。

血凝抑制实验报告(通用3篇)

血凝抑制实验报告篇篇11一、原理流感病毒颗粒表面的血凝素(HA)蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，AHA试验由此得名。 AHA蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰AHA蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。 二、应用该试验是目前OWHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。 三、缺点只有当抗原和抗体AHA亚型相一致时才能出现IHI现象，各亚型间无明显交叉反应;除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水...。 血凝抑制实验报告(通用3篇) 内容提示:血凝抑制实验报告篇篇11一、原理流感病毒颗粒表面的血凝素(HA)蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，AHA试验由此得名。 可用于流感病毒分离株AHA亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。 三、缺点只有当抗原和抗体AHA亚型相一致时才能出现IHI现象，各亚型间无明显交叉反应;除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素;需要在每次试验时进行抗原标准化;需要正确判读的技能。 四、试验步骤1阿氏(Alsevers)液配制称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100mL，散热溶解后调HpH值至6.1，n69kPa15min高压灭菌，44℃保存备用。 (3.8%枸橼酸钠(g3.8g枸橼酸钠，l100ml超纯水)，10n1kPa，20min高压灭菌，44℃保存备用，，保存期11个月)。 阅读了该文档的用户还阅读了这些文档

血凝与血凝抑制试验原理

提供血凝与血凝抑制试验原理文档免费下载，摘要:血凝与血凝抑制试验原理血凝与血凝抑制试验是一种常用的血液凝血功能检测方法，用于评估体内凝血系统的功能状态。 血凝试验原理:血凝试验通常采用活化部分凝血时间(APTT)或凝血酶时间(TT)来衡量血液凝血的能力。 在血凝试验中，通过向血浆中加入一定。 血凝与血凝抑制试验原理血凝与血凝抑制试验是一种常用的血液凝血功能检测方法，用于评估体内凝血系统的功能状态。 在血凝试验中，通过向血浆中加入一定量的凝血酶原激活体(如凝血酶)，观察血浆在特定条件下形成凝块的时间。 正常血液凝固功能良好的人，凝血时间较短，血浆在凝血酶原激活体的作用下能很快形成凝块。 血凝抑制试验原理:血凝抑制试验是为了检测某些抗凝物质(如抗凝血酶、抗凝血酶原等)对凝血系统的抑制作用。 在血凝抑制试验中，首先向血浆中加入一定量的凝血酶原激活体，观察血浆在特定条件下形成凝块的时间。 然后再加入待测的血凝抑制物质，在不同浓度下观察凝血时间的变化。 如果抗凝物质的浓度越高，凝血时间延长的程度越大，则说明该抗凝物质对凝血系统的抑制作用越强。 血凝与血凝抑制试验的原理即通过衡量血浆的凝血时间来评估凝血系统的功能状态或抑制物质的抑制能力。 搜索导航新浪认证诚信网站绿色网站可信网站非经营性网站备案email返回顶部

血凝抑制实验报告(通用20篇)(11页)

二、原理首先让尖端电极和球型电极与平板电极的间隔相等。 这是由于电荷在导体上的分布与导体的曲率半径有关。 导体上曲率半径越小的地方电荷积聚越多(尖端电极处)，两极之间的电场越强，空气层被击穿。 反之越少(球。 血凝抑制实验报告(通用20篇).docx11页 需要金币:*金币(10金币=人民币1元) 血凝抑制实验报告(通用20篇).docx 想预览更多内容，点击免费在线预览全文 尖端电极放电，而球型电极未放电。 反之越少(球型电极处)，两极之间的电场越弱，空气层未被击穿。 而此时球型电极与平板电极之间的间隔最近，放电只能在此处发生。 三、装置一个尖端电极和一个球型电极及平板电极。 四、现象演示让尖端电极和球型电极与平板电极的间隔相等。 接着让尖端电极与平板电极之间的间隔大于球型电极与平板电极之间的间隔，放电在球型电极与平板电极之间发生五、争论与思索雷电暴风雨时，最好不要在空旷平坦的田野上行走。 为什么?血凝抑制试验报告篇10学校班级试验日期年月日同组人一、试验名称:测量平均速度二、试验目的:1.学会用试验的方法测出小车在斜坡各段的平均速度，验证小车在斜坡滑下是前半程快还是后半程快。 2稳固刻度尺和秒表的使用。 三、试验原理:v=s/t四、试验器材:停表、木板、小车、刻度尺、金属片、木块五、需要测量的物理量:路程s和时间t六、试验步骤:1.将木块的一端用木块垫起，使它保持很小的坡度。 2.将小车放在斜面顶端，金属片放在斜面底端，用刻度尺测出小车通过的路程s1，用停表测量通过这段路程所用的时间t1。 3.根据测得的s1、t1，利用公式v1=s1/t1算出小车通过斜面全程的平均速度v1。 4.将金属片移至斜面中部，重复上述过程，进展第二次测量。 5.利用s1—s2=s3，t1—t2=t3，求出v3。 6.搜集数据的表格:路程S1=S2=S3=S1-S2=运动时间平均速度t1=t2=t3=t1-t2=V1=V2=V3=八、结论:小车在半程运动的速度快。 〔填“前〞或“后〞〕血凝抑制试验报告篇11随着中国在国际贸易的地位的不断上升，我们学习国际贸易专业的同学们要把握有关于国际贸易方面的学问也要不断增加，这次学校给了我们一个很好的试验熬炼时机，就是让我们模拟国际贸易实务操作，从而从中把握国际贸易流程。 一、试验目的:1.利用SimTrade供应的各项资源，做好交易前的预备工作。 2.学会运用网络资源宣扬企业及产品。 3.使用邮件系统进展业务磋商，把握往来函电的书写技巧。 4.把握不同贸易术语在海运、保险方面的差异。 在询盘、发盘、还盘、承受环节的磋商过程中，敏捷使用贸易术语(CIF、CFR、FOB)与结算方式(L/C、T/T、D/P、D/A)，正确核算本钱、费用与利润，以争取较好的成交价格。 5.根据磋商内容，正确使用贸易术语与结算方式签订外销合同。 6.把握四种主要贸易术语(L/C、T/T、D/P、D/A)的进出口业务流程。 7.根据磋商内容做好备货工作，正确签订国内购销合同。 8.正确推断市场走向，做好库存管理。 9.正确填写各种单据(包括出口业务中的报检、报关、议付单据，进口业务中的信誉证开证申请)。 10.把握开证、审证、审单要点。 11.学会合理利用各种方式掌握本钱以到达利润最大化的思路。 12.体会国际贸易的物流、资金流与业务流的运作方式，体会国际贸易中不同当事人的不同地位、面临的详细工作与互动关系。 二、试验方法:上机模拟操作三、试验软件:SIMTRADE软件四、试验时间:x年1月4日x年1月8日五、试验内容:1、利用网络发布广告、搜寻信息;2、同业务伙伴建立合作关系;3、进出口本钱核算;4、询盘、报盘、还盘、成交;5、外销合同的签订;6、信誉证的开证;7、信誉证的审证和改证;8、内购合同的签订;9、租船定舱;10、进出口货物保险及索赔;11、进出口报检事宜;12、缮制报关单据;13、办理进出口报关;14、缮制议付单据;15、银行处理议付结汇;16、办理出口核销退税;17、各种成交方式和付款方式的详细施行。 Simtrade外贸试验平台分五个主角，分别为出口商、进口商、工厂、出口地银行和进口地银行。 出口商:出口商作为独立的经营单位，自主制定销售策略并且负责施行:同供应商、进口商建立业务联络;就一个或者多个工程进展商务会谈;敏捷应用各种成交手段完成业务获得利润;还要随时把握公司的业务、库存和资金状况，以便对消失的问题做出正确推断和合理解决。 进口商:进口商必需紧跟本国消费市场和国际贸易市场的变化，合理调配有限的资金，不断变化思路，凭借敏锐的感觉，选择最有利润的工程，加快公司的资金周转率。 这可是一项布满挑战和乐趣的工作。 工厂:供应商通过消费商品并且出售获得利润，所以对于他们来说，消费出市场需求的产品是最重要的。

[血凝抑制实验]血凝实验操作报告.docx

一、血凝试验操作程序1、取96孔90V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的1〜12孔每孔加25uLPBS液。 2、吸取25uL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25uL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25uL加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔，最后弃去25uLo第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25uL1%的鸡红细胞悬液。 5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温(20-25C。 )静置30min观察结果(如果环境温度太高，可置4C。 环境下)。 6、结果判定:将板作45倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。 以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。 (即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板，用移液器在第1〜12孔各加入25uLPBS。 3、在第1孔加入25uL被检血清，充分混匀后移出25uL加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25uL。 4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份)，作对照孔。 5、在第1〜12孔各加入25uL4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25C。 下静置30min。 6、每孔加入25uL1%的鸡红细胞悬液。 置于微量振荡器上轻轻混匀，室温(20-25C。 )静置40min后观察结果，若环境温度过高，可于4C条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2Iog2，阳性对照孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。 将酶标板作45倾斜，以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。 当被检血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。 三、试验过程中的注意事项样品的保存及试验前处理采集的血液样品应及时分离血清，最好分装至离心管中，标记清楚，离心后吸出血清，对应编号冷藏送检，并禁止运输过程中剧烈震动。 一般情况下，在5天内检测的样品可放置在4C的冰箱中冷藏，否则低温冷冻保存。 对出现胶冻状的血清样品，可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。 胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清，可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。 不建议直接吸取其中少量的清亮血清。 具体操作方法:56C。 水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞，轻摇后静置30分钟，离心，收集上清液即可。 酶标板的选择:建议使用96孔90V型板进行试验，通过反复试验证明:90V型板相对于110板及130板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。 移液枪的选择及使用:单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程，以便精确度的提高。 使用时应采用一档吸液二档排液的方法。 吸取液体时，枪头要深入液下缓慢平稳吸液。 加缓冲液时应加在板孔底部。 加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样，以免交叉污染，影响试验结果。 加样、倍比稀释时应高度集中注意力，以免漏加、重复加样等。 试剂的保存及配置禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置，试验前应提前将其恢复至室内温。 抗原的保存温度为-20C。 ，反复冻融会降低抗原的滴度，应避免反复冻融。 、应尽量现用现配每次使用前应测PH值，以免时间过长而导致PH值发生改变。 由于PH试纸跨度范围偏大，PH值不易准确介定，因此最好采用酸度计准确测量PH值，以提高试验的精确度。 1%红细胞的制备为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象，因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。 当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂，如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。 采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中，，，离心后，离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀，易沉积在管底部，达不到洗脱干净的目的。 经2000〜300Or/min，5~10min，弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜，再加入十倍以上血量的PBS液，上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂)，使其充分混匀，再离心弃去上清液，反复几次直至上清液清亮透明为止。 制备好的红细胞液如果放置后上清液变红，说明有溶血，不可再使用。 抗原液的配制先做血凝试验测定效价，以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原，配制4HUA抗原应往前推算两孔，即除以4后的值。 每次做试验前，必须重新检测禽流感抗原的血凝效价，以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确，从而导致试验结果不准确。 为保证配制的抗原准确，还要进行抗原回滴试验。

血凝抑制实验报告文档3篇

血凝抑制实验报告文档3篇.docx 今泰学院推荐文档第1页共20页血凝抑制实验报告文档3篇Reportdocumentofhemagglutinationinhibitiontest编订:JinTaiCollege今泰学院推荐文档第2页共20页血凝抑制实验报告文档3篇小泰温馨提示:实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来，经过整理，写成的书面汇报。 本文档根据实验报告内容要求展开说明，具有实践指导意义，便于学习和使用，本文下载后内容可随意修改调整及打印。 本文简要目录如下:【下载该文档后使用Word打开，按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1:血凝抑制实验报告文档2、篇章2:血凝抑制实验报告文档3、篇章3:血凝抑制实验报告文档篇章1:血凝抑制实验报告文档禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。 该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法，而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品，并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点，已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。 但因该试验受人为操作影响较大，经今泰学院推荐文档第3页共20页常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题，现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。 一、血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μLPBS液。 2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25μL加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔，最后弃去25μL。 第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。 5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温(20-25℃)静置30min观察结果(如果环境温度太高，可置4℃环境下)。 今泰学院推荐文档第4页共20页6、结果判定:将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。 以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。 (即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板，用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。 3、在第1孔加入25μL被检血清，充分混匀后移出25μL加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25μL。 4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份)，作对照孔。 5、在第1~12孔各加入25μL4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25℃下静置30min。 6、每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液。 置于微量振荡器上轻轻混匀，室温(20-25℃)静置40min后观察结果，若今泰学院推荐文档第5页共20页环境温度过高，可于4℃条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2，阳性对照孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。 将酶标板作45°倾斜，以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。 当被检血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。 三、试验过程中的注意事项1样品的保存及试验前处理1.1采集的血液样品应及时分离血清，最好分装至离心管中，标记清楚，离心后吸出血清，对应编号冷藏送检，并禁止运输过程中剧烈震动。 1.2一般情况下，在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏，否则低温冷冻保存。 1.3在检测前血清样品应充分混匀，混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可，切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。 今泰学院推荐文档第6页共20页1.4对出现胶冻状的血清样品，可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。 胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清，可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。 不建议直接吸取其中少量的清亮血清。 1.5水禽等样品为排除非特异性反应，还应相应进行灭能反应。 具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞，轻摇后静置30分钟，离心，收集上清液即可。 2.1酶标板的选择:建议使用96孔90°V型板进行试验，通过反复试验证明:90°V型板相对于110°板及130°板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。 2.2移液枪的选择及使用:①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程，以便精确度的提高。 ②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。 吸取液体时，枪头要深入液下缓慢平稳吸液。 加缓冲液时应加在板孔底部。

血凝抑制试验实验原理是什么

首先还是需要明确几个概念。有血凝素的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象。血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验。因此血凝抑制试验是一种测定抗原或抗体的技术，即在病毒的悬液中加入特异性抗体，导致红细胞的凝集现象被抑制。血凝抑制试验实验原理是什么1人回答49人阅读血凝抑制试验实验原理是什么首先还是需要明确几个概念。有血凝素的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象。血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验。因此血凝抑制试验是一种测定抗原或抗体的技术，即在病毒的悬液中加入特异性抗体，导致红细胞的凝集现象被抑制。

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按性质的不同，报告可划分为:综合报告和专题报告;按行文的直接目的不同，可将报告划分为:呈报性报告和呈转性报告。 该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法，而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品，并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点，己经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测屮最为常用的方法。 但因该试验受人为操作影响较大，经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题，现根据几年来的工作经验对该试验过程屮应注意的事项做一探讨。 一、血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的1、12孔每孔加25PLPBS液。 2、吸取25卩L标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25UL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25卩L加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孑L，最后弃去25卩L。 第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25UL1%的鸡红细胞悬液。 5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温(20-25C)静置30min观察结果(如果环境温度太高，可置4°C环境下)。 6、结果判定:将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。 以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。 (即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板，用移液器在第ri2孔各加入25uLPBSo3、在第1孔加入25卩L被检血清，充分混匀后移出25卩L加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去254、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份)，作对照孔。 5、在第112孔各加入25PL4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25C下静置30mino6、每孔加入25UL1%的鸡红细胞悬液。 置于微量振荡器上轻轻混匀，室温(20-25D静置40min后观察结果，若环境温度过高，可于4°C条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。 将的标板作45°倾斜，以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。 当被检血清效价大于等于41og2，判为禽流感抗体阳性。 三、试验过程中的注意事项1样品的保存及试验前处理1.1采集的血液样品应及时分离血清，最好分装至离心管中，标记清楚，离心后吸出血清，对应编号冷藏送检，并禁止运输过程中剧烈震动。 1.2一般情况下，在5天内检测的样品可放置在4C的冰箱中冷藏，否则低温冷冻保存。 1.3在检测前血清样品应充分混匀，混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可，切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。 1.4对出现胶冻状的血清样品，可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。 胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清，可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析岀状态。 不建议直接吸取其屮少量的清亮血清。 1.5水禽等样品为排除非特异性反应，还应相应进行灭能反应°具体操作方法:56°C水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞，轻摇后静置30分钟，离心，收集上清液即可。 PAGEPAGE#2器材的选择1酶标板的选择:建议使用96孔90。 V型板进行试验，通过反复试验证明:90°V型板相对于110°板及130°板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。 2.2移液枪的选择及使用:单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程，以便精确度的提高。 使用时应采用一档吸液二档排液的方法。 吸取液体时，枪头要深入液下缓慢平稳吸液。 加缓冲液时应加在板孔底部。 倍比稀释血清时，应每孔至少反复吹吸6次，以便混合均匀，还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。 加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样，以免交叉污染，影响试验结果。 3试剂的保存及配置3.1禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置，试验前应提前将其恢复至室内温。 抗原的保存温度为-20C，反复冻融会降低抗原的滴度，应避免反复冻融。 3.2PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备应尽量现用现配每次使用前应测PH值，以免时间过长而导致PH债发生改变.由于PH试纸跨度范围偏大，PH值不易准确介定，因此最好采用酸度计准确测量PH值，以提高试验的精确度。 全部试验均采用同一种稀释液。 3.31%红细胞的制备为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象，因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。

血凝抑制试验原理

血凝抑制试验原理 血凝抑制试验，在临床上也称为血液凝集抑制试验。 它可以分为直接血液凝集抑制试验，和间接血液凝集试验，主要的原理是通过红细胞作为致敏颗粒来进行的。 一般是通过把抗体吸附到相关的载体上，然后与相应的抗原反应出现凝集现象。 它可以检测多种病毒，比如风疹病毒以及禽流感病毒等等。 地塞米松是由人工合成的一种具有最强的生物作用的糖皮质激素，小剂量的地塞米松就可以达到天然皮质醇的作用。 而地塞米松抑制试验，主要就是利用地塞米松的特点和地塞米松的使用对垂体、下丘脑所分泌的促肾上腺皮质激...。 呼气实验是一项检查胃内有没有幽门螺杆菌感染的检查项目。 呼气实验阴性，说明胃内没有幽门螺杆菌感染，自然无需特殊治疗，仅治疗胃病就可以了。 如果呼气试验结果表现为阳性，则需要通过药物进行抗幽门螺杆菌的治疗。 碳13呼气实验的原理，主要就是通过幽门螺杆菌的尿素酶分解尿素，产生氨气和二氧化碳，进一步明确胃部是否有幽门螺旋杆菌的情况。 检测的时候需要空腹，可以先进行收集一个呼气样本，然后间隔30分钟后服用专门的药...。 凝血功能是人体比较重要的一种功能。 一般人体内存在有抗凝系统和纤溶系统，这两个系统存在一个动态平衡。 第一，患者可能抽血的时候，血液很容易就凝固，凝固时间比...。 1、晨起时头晕:血凝患者血液黏稠度较高，容易影响脑部供血，如果脑组织供血不足，会影响正常睡眠，导致晨起时头晕。 2、嗜睡:血凝会使血流动力学发生改变...。 血浆凝固酶试验原理A:血浆凝结酶是由诸如葡萄球菌之类的病原细菌产生的一种酶，它会感染人体，使含有抗凝剂的血浆凝结，只有高致...北京康辰药业股份...北京康辰药业股份...功效主治:本品用于外科手术浅表创面渗血的止血，是否...

血凝抑制实验报告

为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常，顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划血凝抑制实验报告禽流感血凝，血凝抑制试验操作方法及注意事项禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用

实验病毒血凝和血凝抑制试验分析报告.ppt

实验病毒血凝和血凝抑制试验分析报告.ppt19页 实验病毒血凝和血凝抑制试验分析报告.ppt 免费在线预览全文实验九质粒电泳病毒的血凝和血凝抑制原理与蛋白质分子类似，核酸也是两性解离分子。 在pH3.5时，碱基上的氨基基团解离，而三个磷酸基团中只有一个磷酸解离，整个核酸分子带正电荷，在电场中向负极泳动;在pH值为8.0~8.3时，碱基几乎不解离，磷酸全部解离，核酸分子带负电荷，向正极移动。 用适应浓度的凝胶介质作为电泳支持物，发挥分子筛的功能，使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异，达到分离的目的。 载样缓冲液其中含有的甘油可以使待电泳样品沉在点样孔底部，避免样品漂浮其中含有的溴酚蓝(某些还含有二甲苯青)可以作为电泳速度度的指示分子，溴酚蓝的迁移位置大约相当于200bp左右的线性DNA分子的迁移位置。 它与DNA的结合无特异性。 当染料分子插入后，导致与DNA结合的染料呈现荧光，DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。 这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处发射出来。 但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。 有一些低毒产品替代:sybrgreen、sybrgold、genefinder电泳准备用透明胶封固玻璃板两头，在板一端放置电泳梳子。 用1×TAE–buffer配制琼脂糖凝胶(0.24gAgaros/32ml1×TAE–buffer)，在微波炉中加热至琼脂糖溶解。 将温热的琼脂糖凝胶倒入胶模中，凝胶厚度在5-7mm之间。 在凝胶完全凝固后，撕去透明胶，小心地将玻璃板移至装有1×TAE–buffer的电泳槽中，轻轻地拔去梳子，且使缓冲液没过胶面。 DNA电泳取9μl的DNA样品与1μl的10*样品缓冲液(甘油，溴酚蓝，DNA稳定剂)混合后，用微量取样器慢慢将混合物加至样品孔中。 当溴酚蓝在凝胶中移出适当距离(根据DNA的大小、1kb和3kb左右的指示剂来判断)后，切断电源，取出玻璃板，在紫外灯下观察，并拍照记录结果，估测质粒分子量的大小。 质粒DNA3条带不是超螺旋、线性和开环这三条带。 碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA，其实这三条带以电泳速度的快慢而排序，分别是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起)。 一实验目的1:学会通过鸡胚接种增殖的病毒的收集2:掌握病毒血凝和血凝抑制试验的基本原理和基本操作3:理解病毒血凝和血凝抑制试验的应用病毒的血凝和血凝抑制二实验原理1:红细胞凝集某些病毒(如流感病毒，新成疫病毒，麻疹病毒等)拥有血凝素糖蛋白，可与人或某些动物的红细胞表面的相应受体结合，从而呈现红细胞凝集现象。 这种凝聚多种病毒都具有，不是完全特异的2:红细胞凝集抑制当病毒被相应抗体中和后，则丧失了凝集红细胞的功能，即病毒的红细胞凝集特性被抑制。 3:利用已知抗体，可通过红细胞凝集抑制试验鉴定某些具红细胞凝集特性的病毒，同样也可利用已知病毒抗原，通过红细胞凝集抑制试验来测定抗体水平，从而评价疫苗的免疫效果，或动物是否受到病毒感染血凝抑制试验是抗原抗体的特异性血清实验4红细胞的解脱现象某些具红细胞凝集特性的病毒还拥有神经氨酸酶活性，其可使病毒从红细胞上解脱下来，因此，血凝试验的时间太长，可能会在高浓度孔见到类似阴性的反应结果，实验过程中必须控制好时间。 三实验操作(一)病毒的鸡胚接种与培养(二)病毒尿囊液的收集37度培养72小时的鸡胚--放置于4度冰箱，致死鸡胚--消毒气室--用镊子打开气室-打开壳膜--用移液器或吸管收集尿囊液于1.5毫升离心管--5000转，离心5分钟，以去除细胞沉淀--上清液供血凝和血凝抑制试验作用.(三)制备1%浓度的鸡红细胞采集新鲜的抗凝血，以生理盐水洗3次，每次离心5分钟，转速为4000转，最后用生理盐水配制成1%浓度.(四)红细胞凝集试验1、50μl的生理盐水加入96孔微量板A、B行的1-12孔。 2、被检病毒液50μl分别加入A、B行(一行为标准病毒，一行为自己收集的病毒)的第一孔，然后倍比稀释至第11孔，弃去50μl，12孔为阴性对照。 3、加50μl的1%鸡红细胞于每一孔，按病毒的低浓度至高浓度加入。 4、混匀、室温静止30min。 5、确定红细胞100%凝聚的病毒的最高稀释度，为HA滴度。 6、血凝效价(HA)的确定将板直立，首先观察红细胞阴性对照，应呈逗点状。 红细胞凝集孔呈颗粒状附于孔底。 能凝集红细胞的最高稀释度即为血凝效价。

血凝抑制实验报告通用3篇

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血凝与血凝抑制实验教程方案.ppt

血凝与血凝抑制实验教程方案.ppt 如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。 血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验一、实验目的二、实验内容三、实验原理四、实验材料五、实验方法与结果判定六、注意事项七、新城疫背景介绍一、实验目的1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法2、了解新城疫有关背景知识二、实验内容1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体三、实验原理1、血凝试验(HA)原理:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝(HA)，也称直接血凝反应。 2、血凝抑制试验(HI)原理:当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。 这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制(HI)反应，也称血凝抑制反应。 四、实验材料1、血凝板(2人/块)2、新城疫阳性血清3、被检血清(1份)4、1%红细胞悬液5、稀释液6、移液器(50ul，2人/把)7、枪头五、实验方法与结果判定血凝试验(HA)1、在血凝板上第一排的1-12孔内各加入50ul生理盐水2、在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul3、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul4、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟5、结果判定结果判定标准1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100%凝集;2、+++:红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75%凝集;3、++:红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50%凝集;4、+:红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25%凝集;5、-:红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集;血凝价的判定以出现++(50%凝集)的抗原最高稀释倍数为该抗原的血凝价(1:128)。 血凝抑制试验1、将病毒抗原稀释成4个血凝单位(1/128×4=1:32)2、在血凝板上1-12孔内各加入50ul生理盐水;3、在第1孔内加入被检血清50ul，然后倍比稀释至第11孔，最后弃50ul;4、第1-12孔内加入4单位抗原50ul(第12孔为病毒对照);5、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul;6、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟6、结果判定结果判定标准1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100%凝集;2、+++:红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75%凝集;3、++:红细胞形成一个环状，四周有下凝集块，即50%凝集;4、+:红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25%凝集;5、-:红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集。 血凝抑制价的判定以出现完全抑制凝集(即不凝集)的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑制价(1:4)。 六、注意事项1、红细胞用前请摇匀2、用枪加样定要准，尽量不要有气泡3、结果判定有耐心4、HA和HI勿相混七、新城疫背景介绍鸡新城疫(NewcastleDiseaseND)1、概述ND是由ND病毒(NewcastlediseaseVirus，NDV)引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。 病毒颗粒表面具有血凝素蛋白，可以刺激机体产生血凝抑制抗体，根据临诊表现和病程长短分为:(1)最急性型:突然发病，病变不明显，见于雏鸡及本病流行初期。 急性型:(典型新城疫)亚急性型(非典型ND)慢性型(非典型ND)(2)、急性型:侵害消化系统为主，也称嗜内脏速发型。 病状特点:a.食欲减退，饮水增加，离群呆立，眼睛半开半闭，翅膀下垂，冠、肉髯呈紫黑色。 b.嗉囊积液、体温升高、呼吸困难。 鼻腔内有大量分泌物，严重拉稀粪便呈黄绿色或褐色，有时混有血。 d.部分患鸡出现神经症状，头颈歪向一侧而咀向上，母鸡产蛋下降。

血凝实验与血凝抑制实验的原理是什么

抗凝剂能抑制血液凝结 血凝实验与血凝抑制实验的原理是基于病毒表面的血凝素与红细胞上的血凝素受体结合，以及抗体对这一结合的抑制作用。

血凝抑制试验原理.ppt

血凝抑制试验原理.ppt，实验十一病毒的血清学实验操作:血凝实验血凝抑制实验实验目的血凝试验:滴定病毒的血凝效价，采用一定的病毒量，通常采用4个血凝单位。 血凝抑制试验:应用标准病毒液测定血清中的相应抗体或应用特异性抗体鉴定新分离的血凝性病毒。 血凝试验原理血凝素(hemagglutininHA):由病毒基因编码的糖蛋白刺突。 与病毒吸附和传入宿主细胞有关。 HA能与人或其它动物多种红细胞表面N-乙酰神经氨酸酶受体结合引起红细胞凝集。 血凝试验结果判定效价判定:凝集特别显著:“++++”凝集现象次之:。 血凝抑制试验原理.ppt11页 需要金币:*金币(10金币=人民币1元) 血凝抑制试验原理.ppt 实验十一病毒的血清学实验操作:血凝实验血凝抑制实验实验目的血凝试验:滴定病毒的血凝效价，采用一定的病毒量，通常采用4个血凝单位。 血凝试验结果判定效价判定:凝集特别显著:++++凝集现象次之:+++凝集清楚可见:++稍显凝集者:+血凝效价:呈++凝集时的最高稀释度。 此时的稀释度即为1个血凝单位。 血凝抑制试验原理病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，称血凝抑制。 利用血凝素特异性抗体与病毒表面相应的HA相互作用，使病毒血凝现象抑制的试验称血凝抑制试验。 血凝抑制试验结果判定测定孔RBC沉于孔底中心，呈纽扣状。 (+)凝集(-)血清对照孔:RBC沉于孔底，无自凝病毒对照孔:凝集RBC对照孔:无自凝血凝抑制试验效价:呈完全血凝抑制使的最高血清稀释度。 思考问题血凝试验中为什么要加补充液?为什么加病毒液和红细胞悬液时要反向加?血凝试验和血凝抑制试验中空白对照的意义?0.2弃掉各0.4ml鸡红血球细胞悬液(ml)各0.2ml补充液(ml)对照1∶25601∶12801∶6401∶3201∶1601∶801∶401∶201∶10病毒稀释度0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.2生理盐水(ml)尿囊液(ml)10987654321孔号血凝试验(血凝效价的滴定)将有机玻璃板孔从1~10进行编号，从第1孔起至第10孔，每孔加生理盐水0.2ml。 将尿囊液按下表进行稀释。 自第10孔开始反方向向前每孔补充0.2ml生理盐水。 (WHY?)自第10孔开始反方向向前每孔加入0.5%鸡红血球0.4ml，摇匀后放置室温45分钟0.2弃掉0.2ml各0.4ml鸡红血球细胞悬液(ml)各0.2ml4个单位病毒液(ml)1∶6401∶3201∶1601∶801∶401∶201∶10抗血清稀释度0.40.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.2生理盐水(ml)抗血清(ml)红细胞对照病毒对照血清对照7654321孔号血凝抑制试验从第1孔起至第9孔，每孔加生理盐水0.2ml，第10孔加0.4ml。 于第1孔至第7孔中各加入0.2ml4个血凝单位的病毒液，第9孔亦加入0.2ml病毒液作病毒对照。 稍加震摇后，每孔加入0.5%鸡红细胞0.4ml，室温静置45分钟。 血凝原理血凝抑制原理*。 审核编号:6234100233000233 Unit3ComparisonandContrast市公开课一等奖省赛课微课金奖PPT课件.pptx2024年联通新融合发展技能竞赛(业务管理及稽核赛道)试题库(含答案).docx2023冠状动脉造影日间手术专家共识(完整版).pdfDB51/T2919-2022FDIS古树名木养护和抢救复壮及管理技术规程.pdf版权处理 血凝抑制试验原理.ppt扫码下载APP微信扫码关注

禽流感血凝抑制实验报告

实验背景:禽流感是一种致病性极强的病毒，不仅会导致家禽的大量死亡，还会对人类健康造成威胁。目前，禽流感的爆发依然是一个严重的公共卫生问题。因此，研究禽流感的分子特性和防治措施具有重要的意义。实验目的:通过血凝抑制实验来检

影响血凝和血凝抑制试验结果的因素分析

影响血凝和血凝抑制试验结果的因素分析.pdf 影响血凝和血凝抑制试验结果的因素分析 2.93M 文档页数: 顶/踩数: June2013，Vol.11，No.17影响血凝和血凝抑制试验结果的因素分析841800)【摘要】目的对影响血凝和血凝抑制试验结果的因素进行统计和分析。 方法选取2011年12月至2012年12月进行检验206例，总结和分析在检验中影响血凝抑制结果的因素。 结果通过分析和总结，影响血凝和血凝抑制试验结果的因素为:样品采集和处理、试剂的配制与储藏、器材的选择和使用、单位抗原的配制、加样、温度、结果判定等。 结论在检验过程中针对影响血凝和血凝抑制试验结果的因素进行注意和避免，能够有效的提高检验的准确性。 【关键词】血凝;血凝抑制;试验结果;影响因素中图分类号:R446文献标识码:A文章编号:1671-8194(2013)17-0368-01血凝和血凝抑制试验是化验室中进行动物疫病诊断和免疫监测最常用的试验方法之一，如禽流感、口蹄疫、SARS等疫病的化验室诊断或免疫监测在基层多使用这种试验方法。 今年在我国其他省市发生多起禽流感等重大动物疫病威胁我省我市。 在这种局势下，省、市、县等各级畜牧兽医部门都对禽流感病毒进行了大量的化验室监测。 然而，准确掌握血凝和血凝抑制试验的操作以及分析，对禽流感等重大动物疫病的诊断和免疫监测尤为重要。 为了更好的提高检验的准确性，本文对影响血凝和血凝抑制试验结果的因素进行分析，现将结果报道如下。 血凝和血凝抑制试验理论和方法血凝抑制试验和血凝主要是对血清抗体的检测试验。 血凝原理是病毒或者是病毒的血凝素，对一种或是几种动物血清红细胞产生凝集反应。 具体的方法是标准抗原同鸡红细胞。 血凝抑制反应(HI):当病毒的悬液中先加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能再与病毒颗粒或其血凝素直接接触。 这时红细胞的凝集现象就被抑制，方法是将检测出血凝单位的标准抗原配制后与受检血清反应，再加入红细胞作用。 这步试验用于检测受检血清抗体血凝抑制滴度，判定受检血清抗体是否为阳性影响影响血凝和血凝抑制试验结果的因素2.1样品采集和处理在检验过程中样本的采集常规温度适宜在约20~25，有利于血压样本的凝固，常规采集血液标本量约为2.5mL，注入试管内置于空气中月40min，血液标本凝固后整理包扎放置冷藏室中放置6~8h，离心取上清液。 如发生胶冻状可使用牙签挤出上清液，进行检验。 样本在运送过程中应避免剧烈的震荡、温度过低、冷藏时间过常等情况发生。 2.2试剂的配制与储藏配制阿氏液，pH值调节精确后，进行高压灭菌后，在标准的温度下进行储备过夜，在加入稀释液、1%红细胞悬液应准确称量、抗原阳性血清的判定，避免温度过低产生血液标本的凝集或是温度过高导致样本发生性状改变。 2.3器材的选择和使用在进行标本的取样和制备的过程中，使用标准加样器，选择密封良好的一次性吸头避免反复使用或是重复使用，避免仪器发生污染和提取样本剂量不标准。 微量反应板使用完毕后应反复多次清洗，避免污染影响下次使用。 2.4单位抗原的配制根据血凝试验结果，配制4单位抗原，4单位抗原宜现用现配。 为防止4单位抗原配制不准确，在HI试验前必须做抗原回归试验2.5加样、温度、结果判定在红细胞悬液和抗体的检验前应进行充分的摇匀，进行多个检验板加样时应缓慢进行，避免加样太快，在进行加样器加样时应垂直滴入，避免液体和孔内液体相接触，避免发生污染影响检验结果。 检验样本的温度适宜控制在20~25，避免温度过高导致样本检验结果发生误差或是温度过低导致样本发生性状改变，检验失败。 运用血清抗体进行的血凝与血凝抑制试验对于动物传播疾病的免疫监测与疫情的控制是非常必要的。 目前也有许多有关血凝与血凝抑制试验影响因素的分析的文献。 因素本文通过对检验206例检验样本的资料进行分析，通过分析和总结，影响血凝和血凝抑制试验结果的因素较为复杂主要为:样品采集和处理、试剂的配制与储藏、器材的选择和使用、单位抗原的配制、加样、温度、结果判定等。 综上所述，在检验过程中针对影响血凝和血凝抑制试验结果的因素进行注意和避免，能够有效的提高检验的准确性。

血凝抑制试验的注意事项及不适宜人群

注意事项检查前禁忌:禁忌暴饮暴食，和剧烈运动，一般是早晨空腹检测。 检查时要求:要注意试验时室内的温度，注意血清标本不被污染，会导致结果呈假阳性。 检查过程首先是从检测者取得血清标本，鉴定病毒的血抑试验，最后是血凝滴度的判定，检查过程主要是医生的操作。 不适宜人群1、服用过避孕药、甲状腺激素、甾体激素等药物的患者，因为可能会影响到检查结果，禁止近期有。 血凝抑制试验的注意事项及不适宜人群 注意事项 检查前禁忌:禁忌暴饮暴食，和剧烈运动，一般是早晨空腹检测。 检查过程 首先是从检测者取得血清标本，鉴定病毒的血抑试验，最后是血凝滴度的判定，检查过程主要是医生的操作。 不适宜人群 1、服用过避孕药、甲状腺激素、甾体激素等药物的患者，因为可能会影响到检查结果，禁止近期有以上药物服药史的患者检查。 2、特殊疾病:患有造血功能减低疾病的患者，比如白血病，各种贫血，骨髓增生异常综合症等，除非该检查必不可少，尽量少抽血。

血凝和血凝抑制实验(课件).ppt

血凝和血凝抑制实验(课件).ppt，血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验一、实验目的二、实验内容三、实验原理四、实验材料五、实验方法与结果判定六、注意事项七、新城疫背景介绍一、实验目的1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法2、了解新城疫有关背景知识二、实验内容1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体三、实验原理1、血凝试验(HA)原理:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝(HA)，也称直接血凝反应 血凝和血凝抑制实验(课件).ppt40页 血凝和血凝抑制实验(课件).ppt 想预览更多内容，点击免费在线预览全文 血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验一、实验目的二、实验内容三、实验原理四、实验材料五、实验方法与结果判定六、注意事项七、新城疫背景介绍一、实验目的1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法2、了解新城疫有关背景知识二、实验内容1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体三、实验原理1、血凝试验(HA)原理:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝(HA)，也称直接血凝反应。 2、血凝抑制试验(HI)原理:当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。 这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制(HI)反应，也称血凝抑制反应。 四、实验材料1、血凝板(2人/块)2、新城疫阳性血清3、被检血清(1份)4、1%红细胞悬液5、稀释液6、移液器(50ul，2人/把)7、枪头五、实验方法与结果判定血凝试验(HA)1、在血凝板上第一排的1-12孔内各加入50ul生理盐水2、在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul3、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul4、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟5、结果判定结果判定标准1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100%凝集;2、+++:红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75%凝集;3、++:红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50%凝集;4、+:红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25%凝集;5、-:红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集;血凝价的判定以出现++(50%凝集)的抗原最高稀释倍数为该抗原的血凝价(1:128)。 血凝抑制试验1、将病毒抗原稀释成4个血凝单位(1/128×4=1:32)2、在血凝板上1-12孔内各加入50ul生理盐水;3、在第1孔内加入被检血清50ul，然后倍比稀释至第11孔，最后弃50ul;4、第1-12孔内加入4单位抗原50ul(第12孔为病毒对照);5、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul;6、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟6、结果判定结果判定标准1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100%凝集;2、+++:红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75%凝集;3、++:红细胞形成一个环状，四周有下凝集块，即50%凝集;4、+:红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25%凝集;5、-:红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集。 血凝抑制价的判定以出现完全抑制凝集(即不凝集)的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑制价(1:4)。 六、注意事项1、红细胞用前请摇匀2、用枪加样定要准，尽量不要有气泡3、结果判定有耐心4、HA和HI勿相混七、新城疫背景介绍鸡新城疫(NewcastleDiseaseND)1、概述ND是由ND病毒(NewcastlediseaseVirus，NDV)引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。 病毒颗粒表面具有血凝素蛋白，可以刺激机体产生血凝抑制抗体，根据临诊表现和病程长短分为:(1)最急性型:突然发病，病变不明显，见于雏鸡及本病流行初期。 急性型:(典型新城疫)亚急性型(非典型ND)慢性型(非典型ND)(2)、急性型:侵害消化系统为主，也称嗜内脏速发型。 病状特点:a.食欲减退，饮水增加，离群呆立，眼睛半开半闭，翅膀下垂，冠、肉髯呈紫黑色。 b.嗉囊积液、体温升高、呼吸困难。 鼻腔内有大量分泌物，严重拉稀粪便呈黄绿色或褐色，有时混有血。 d.部分患鸡出现神经症状，头颈歪向一侧而咀向上，母鸡产蛋下降。 病变特点:全身的粘膜和浆膜出血，突出病变在消化道。 A.腺胃粘膜水肿，粘膜上的乳头及其周围有出血点，间有溃疡。 B.腺胃与肌胃、腺胃与食道交界处粘膜可见到出血点或出血带。 症状:多见4-35日龄鸡，25日龄前后最常发病。

血凝及血凝抑制试验应注意的一些小问题(学术)

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血凝与血凝抑制试验标准方法.pdf

血凝与血凝抑制试验标准方法.pdf，血凝抑制(HI)试验操作规程1.仪器、设备和试剂的准备1.1仪器及设备V型96孔血凝板、微量振荡器、低速台式离心机、含25μL的单道加样器、含25μL的八道加样器、小圆底试管、吸管1.2抗原和试剂:1.2.1相应HI抗原1.2.2相应阳性血清1.2.3生理盐水、阿氏液(血球保护液)1.2.41%鸡红细胞悬液1.2.4.1红细胞的采集从2-6月龄SPF公鸡翅静脉采集血液与等量的阿氏液混合(采集后上下颠倒使血液和阿氏液混匀，防止凝血)1.2.4.2红细胞的洗 血凝与血凝抑制试验标准方法.pdf4页VIP 血凝与血凝抑制试验标准方法.pdf 血凝抑制(HI)试验操作规程1.仪器、设备和试剂的准备1.1仪器及设备V型96孔血凝板、微量振荡器、低速台式离心机、含25μL的单道加样器、含25μL的八道加样器、小圆底试管、吸管1.2抗原和试剂:1.2.1相应HI抗原1.2.2相应阳性血清1.2.3生理盐水、阿氏液(血球保护液)1.2.41%鸡红细胞悬液1.2.4.1红细胞的采集从2-6月龄SPF公鸡翅静脉采集血液与等量的阿氏液混合(采集后上下颠倒使血液和阿氏液混匀，防止凝血)1.2.4.2红细胞的洗涤将于阿氏液混合的血液，分装于圆底试管中，以1000rpm离心5分钟，吸弃阿氏液;加入适量生理盐水轻轻吸打将红细胞充分混合，以1500rpm离心5-10分钟，吸弃上清液时，应注意吸弃红细胞表面的白细胞层，并应尽量吸净上清液按上述步骤，用生理盐水对红细胞进行洗涤三次，最后一次洗涤应1500rpm离心10分钟(确保红细胞的压积)1.2.4.3吸弃上清液，将沉淀的红细胞吸取1ml，加入99ml生理盐水摇匀配制成1%的红细胞悬液(按照需要量配制)1.2.4.41%红细胞悬液的标定对首次配制的红细胞悬液应进行标定，取配制好的红细胞悬液60ml，自然沉降后，弃掉上部生理盐水50ml，混匀后装入刻度离心管中，1000rpm离心5分钟，红细胞压积应为0.6ml2.HI抗原工作液配制2.1HI抗原血凝价测血凝试验:1.取一块V型96孔板，按表1每孔加入生理盐水25ul，将HI抗原进行系列倍比稀释，至11孔后吸取25ul弃去，第12孔为对照，稀释后每孔再加入25ul生理盐水，最后每孔加入1%鸡红细胞悬液25ul，微量振荡器中速摇匀，置于室温(20—25℃)，20~30分钟后判定结果，以能使100%红细胞凝集的抗原最高稀释倍数作为判定终点表1病毒血凝试验孔号:123456789101112滴度:1:21:41:81:161:321:641:1281:2561:5121:10241:2048对照生理盐水252525252525252525252525()2525252525252525252525抗原病毒弃去生理盐水252525252525252525252525红细胞悬液252525252525252525252525轻轻振荡1-2min置于20~25℃静置20-25min后判定结果图1如图1所示为禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原的血凝价测定，第9孔为能使100%红细胞凝集的抗原最高稀释倍数，因此该禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原血凝价为1:5122.2HI抗原工作液配制及检验2.2.14HA单位的抗原配制1004个100%血凝单位(即4HA)抗原的稀释倍数=使100%红细胞凝集的抗原最高稀100释倍数/4图1所示禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原的4HA单位的抗原=512/4=1281002.2.24HA单位抗原的检验1004HA单位抗原的检验按表2进行。 检查血凝价是否准确，应将配置好的4HA单100100位的抗原再用生理盐水稀释，使其稀释度为1:2、1:3、1;4、1:5、1:6、1:7将每一稀释度的抗原25ul加入生理盐水25ul，最后加入1%鸡红细胞悬液25ul，用微量振荡器中速振匀，置室温(20~25℃)，20~30分钟后判定结果将血凝板在20~25℃下放置20~30分钟后，如果1:4稀释度是100%红细胞凝集终点，说明配制的是4HA单位的抗原;如果100%红细胞凝集终点是15或16说明配制的4HA100100单位抗原实际上高于4个单位;如果100%红细胞凝集终点是1:2或1:3说明配制的4HA100单位抗原实际上低于4个单位。

血凝试验和血凝抑制试验的影响因素及应对措施

安徽农学通报，AnhuiAgri.Sci.Bull.011804血凝试验和血凝抑制试验的影响因素及应对措施蒋作强1车跃光(1池州市贵池区畜牧兽医局，安徽池州47000;宿州市动物疫病预防与控制中心)摘要:介绍了血凝试验HA和血凝抑制试验HI中的常见问题，主要包括:对照孔凝集;全部凝集;红细胞全部下沉;标准阳性对照血清的抗体效价与原结果误差大于1个滴度;泪滴状流淌完全血凝抑制线细等;结果出现慢或结果出现快，并且整板无凝集现象等。 关键词:血凝试验;血凝抑制试验试验;影响因素;应对措施中图分类号R44...。 我是一名大学生我的性格偏于内向，为人坦率、热情、讲求原则;处事乐观、专心、细致、头脑清醒;富有责任心、乐于助人 血凝试验和血凝抑制试验的影响因素及应对措施 内容提示:安徽农学通报，AnhuiAgri.Sci.Bull.2012，18(02)24血凝试验和血凝抑制试验的影响因素及应对措施蒋作强1车跃光2(1池州市贵池区畜牧兽医局，安徽池州247000;2宿州市动物疫病预防与控制中心)摘要:介绍了血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)中的常见问题，主要包括:对照孔凝集;全部凝集;红细胞全部下沉;标准阳性对照血清的抗体效价与原结果误差大于1个滴度;泪滴状流淌(完全血凝抑制)线细等;结果出现慢或结果出现快，并且整板无凝集现象等。 分析了其影响因素，并提出了应对措施。 安徽农学通报，AnhuiAgri.Sci.Bull.2012，18(02)24血凝试验和血凝抑制试验的影响因素及应对措施蒋作强1车跃光2(1池州市贵池区畜牧兽医局，安徽池州247000;2宿州市动物疫病预防与控制中心)摘要:介绍了血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)中的常见问题，主要包括:对照孔凝集;全部凝集;红细胞全部下沉;标准阳性对照血清的抗体效价与原结果误差大于1个滴度;泪滴状流淌(完全血凝抑制)线细等;结果出现慢或结果出现快，并且整板无凝集现象等。 关键词:血凝试验;血凝抑制试验试验;影响因素;应对措施中图分类号R446.11文献标识码A文章编号1007-7731(2012)02-024-002血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)由于能同时进行大量样本分析，试验过程易于操作以及结果快速、准确等特点而成为我国各地动物防疫监督机构和养殖场户进行流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要手段之一。 尽管此监测方法操作简便、快捷、准确和实用，但是在实践中由于某些因素的影响，导致试验结果不准确，甚至无法判定。 笔者根据多年的实践操作将实验中的影响因素浅析如下。 1血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)中的常见问题血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)中的常见问题主要有:(1)对照孔凝集;(2)全部凝集;(3)红细胞全部下沉;(4)标准阳性对照血清的抗体效价与原结果误差大于1个滴度;(5)泪滴状流淌(完全血凝抑制)线细;(6)结果出现慢或结果出现快，并且整板无凝集现象;(7)凝集板出现跳孔现象;(8)凝集不明显，无法判定结果。 2影响因素及应对措施2.1样品方面(1)被检血清腐败变性。 血样采集后要及时分离血清，分离后即时测定或放置在4℃冰箱内保存，要力求新鲜。 (2)部分禽类血清中非特异性血凝抑制因子影响，尤其是水禽血清在做禽流感血凝抑制试验时会出现对照孔和对照孔后2～3孔有凝集现象。 因此，在利用血凝抑制试验进行血清抗体测定之前，有必要对血清中非特异性因子进行排除。 2.2试剂器材方面(1)缓冲液配制时间过长，pH值发生变化，使凝集不明显。 缓冲液(PBS)尽可能现配现用，浓度和酸碱度要准确，可用HCL和NAOH液调节酸碱度，并用pH试纸进行测试到pH值合适为止。 如果用生理盐水代替缓冲液，要使用新生产、新开瓶的生理盐水。 (2)4个血凝单位(HAU)抗原配制不准确。 为防止4个HAU抗原配制不准确.在作HI试验前必须做4单位抗原校正。 即在不加血清的情况下，第1～3孔的血球完全凝集，第4孔50%凝集呈点状，说明4单位抗原的配制可以使用。 否则，需重新测定抗原效价，重新配制4个HAU抗原，并作4单位抗原校正，直至结果准确。 (3)红细胞的来源。 配制红细胞悬液应采集2只以上成年公鸡的血，一般要求用非免疫公鸡，如果用免疫公鸡代替，但应增加洗涤次数和时间。 (4)凝集板不干净。 目前，实验单位和基层多使用一次性96孔V型板，要保持板面及凹孔的干净。 2.3操作方面(1)在使用微量移液器时，液体加入量发生误差。 在使用微量移液器时，每个吸头要安装牢固，防止漏气;操作时手压下的力度要均匀。 移液管嘴浸入液面下的深度要力求一致，不可过深，否则留在管嘴外的液体也滴入孔内，吸取量增大，对抗体滴度发生影响。 (2)在稀释血清时，产生气泡。